Ժամանակակից բժշկությունն ունի ախտորոշման հատուկ մեթոդներ, որոնք հնարավորություն են տալիս մարդկանց մոտ հիվանդությունների էթիոլոգիան հաստատել՝ հիմնվելով պաթոգեն, գենետիկորեն օտար նյութերի, որոնք խթանում են իմունային պատասխանը, նուկլեինաթթուները, ինչպես նաև ալերգիկ և իմունային փոփոխությունները: որոնք տեղի են ունենում նրա գործողությունների պատճառով: Այսօր ՌԻԱ-ն լայնորեն կիրառվում է իմունաբանության և վիրուսաբանության մեջ, այսինքն՝ ռադիոիմունային վերլուծության մեջ, ընդլայնման նպատակները, բաղադրիչները, ընթացքը, որի հաշվառումը, մենք կքննարկենք այս հոդվածում: Այս վերլուծությունը կարող է հայտնաբերել անտիգենները հակամարմինների հետ նրանց փոխազդեցության արդյունքում:
Սահմանում
RIA-ն հեղուկներում կենսաբանորեն ակտիվ նյութերի ախտորոշման մեթոդ է, որը հիմնված է հակագենների հակամարմինների հետ հակամարմինների ռեակցիայի վրա, երբ օգտագործվում են ռադիոնուկլիդներով պիտակավորված անալոգային նյութեր, որոնք ունեն հատուկ կապող համակարգեր: Նրանց փոխազդեցությունից հետոձևավորվում է իմունային համալիր, որը առանձնացվում է և ուսումնասիրվում նրա ռադիոակտիվությունը։ Հայտնի է, որ ռադիոիմունային անալիզն իրականացվում է ռեագենտների ստանդարտ փաթեթների միջոցով։
Յուրաքանչյուր ռեագենտ կարող է որոշել մեկ կոնկրետ նյութի կոնցենտրացիան: Մարդու միջից վերցված կենսաբանական հեղուկը խառնում են ռեագենտի հետ, ինկուբացիոն շրջանից հետո առանձնացնում են ազատ և կապակցված ռադիոակտիվ նյութերը, այնուհետ կատարվում ռադիոմետրիա և հաշվարկվում արդյունքները։ Յոդի իզոտոպն օգտագործվում է նյութերը պիտակավորելու համար։ Նշվում և ավելացվում է որոշակի քանակությամբ։
Դիմում
Ռադիոիմունային անալիզը լայն կիրառություն ունի բժշկության և մանրէաբանության մեջ։ Օգտագործվում է սրտի և անոթային հիվանդությունների, էնդոկրին և մարմնի այլ համակարգերի հիվանդությունների ախտորոշման համար։ RIA-ները հաճախ օգտագործվում են նաև անպտղության պատճառը, պտղի զարգացման պաթոլոգիան բացահայտելու համար: Ուռուցքաբանության մեջ այս վերլուծությունը կատարվում է նորագոյացությունների մարկերները որոշելու նպատակով, որպեսզի հնարավոր լինի վերահսկել բուժման արդյունավետությունը: Իմունոլոգիայում RIA-ն օգտագործվում է արյան մեջ իմունոգոլոբուլինների, ֆերմենտների, սպիտակուցների և այլնի առկայությունը ուսումնասիրելու համար։ Այսօր այս անալիզը թույլ է տալիս բացահայտել տարբեր հորմոնների կոնցենտրացիան մինչեւ մեկ գրամի միլիոներորդական մասը։ Այսպիսով, ռադիոիմունային արյան անալիզը լայնորեն կիրառվում է սրտաբանության, ուռուցքաբանության, էնդոկրինոլոգիայի, գինեկոլոգիայի և վիրուսաբանության մեջ։
RIA մեթոդներ
Ընդունված է տարբերակել վերլուծության մի քանի մեթոդներ՝ կախված բնույթիցռեակցիաներ:
- Ոչ մրցակցային մեթոդը բնութագրվում է ռեակցիայի այնպիսի բաղադրիչներով, ինչպիսիք են ստանդարտ և հայտնաբերվող անտիգենները, բուֆերային լուծույթը, իզոտոպով պիտակավորված հակամարմինները, որոշակի հակամարմինները, որոնք կապվում են սորբենտին: Փորձարկվող հակամարմիններին ավելացվում է հակագեն: Ինկուբացիայից հետո առաջանում են հակագեն-հակամարմին բարդույթներ, սորբենտը լվանում են, ավելացվում են պիտակավորված հակամարմիններ, որոնք կապվում են համալիրի անտիգենին։ Ռադիոակտիվությունը կախված է փորձարկվող հակագենի կոնցենտրացիայից:
- Մրցակցային ռադիոիմունային վերլուծությունը պայմանավորված է հակագենային մրցակցությամբ: Այստեղ կան ռեակցիայի այնպիսի բաղադրիչներ, ինչպիսիք են հսկիչ և որոշված անտիգենները, բուֆերային լուծույթը, որոշակի հակամարմիններ, որոնք կապում են սորբենտին, ինչպես նաև իզոտոպով պիտակավորված անտիգեն։ Ախտորոշումը սկսվում է հետազոտվող հակագենի ներդրմամբ: Սորբենտի վրա ձևավորվում է հակագեն-հակամարմին համալիր։ Այնուհետեւ սորբենտը լվանում է, եւ պիտակավորված հակագենը ներարկվում է: Դրանով այն կապվում է հակամարմինների հետ: Հաշվիչների օգնությամբ չափվում է ռեակցիան և ռադիոակտիվության քանակը։ Այն հակադարձ համեմատական կլինի նմուշի հակագենի քանակին:
- Անուղղակի մեթոդը ամենատարածվածն է: Այս դեպքում ռեակցիայի բաղադրիչի ռադիոիմունային անալիզն ունի հսկիչ և փորձարկման շիճուկ, հակագեններ կամ հակամարմիններ, որոնք կապված են սորբենտի վրա, իզոտոպներով պիտակավորված հակամարմիններ, բուֆերային լուծույթներ: Ախտորոշված հակամարմինները կամ անտիգենները արձագանքում են հակագենների կամ հակամարմինների հետ, որոնք կապված են սորբենտին: Այնուհետև ինկուբատը հանվում է, ներարկվում են պիտակավորված հակամարմիններ, որոնք կապվում ենհակագեն-հակամարմին համալիրներ.
Վերլուծության մեթոդիկա
Այսպիսով, ռադիոիմունային անալիզն իրականացվում է հատուկ ռեակտիվների միջոցով։ Կոմպլեկտները ստանդարտ են, ուստի որևէ սխալ կամ խախտում չի թույլատրվում: Ախտորոշման արդյունքները հուսալի են: Վերլուծությունը կատարվում է առավոտյան, դրա համար մարդուց երակային արյուն են վերցնում։ Լաբորատորիայում արյունից առանձնացվում է շիճուկ, որը կօգտագործվի ՌԻԱ-ի համար։ Այս շիճուկը խառնվում է ռեակտիվների հետ։ Ստացված խառնուրդը ինկուբացվում է տվյալ ջերմաստիճանում թերմոստատում։
Ստացված խառնուրդում առանձնացնում են ազատ և կապված իզոտոպները։ Դրանից հետո ստացված նյութը հետազոտվում է, արդյունքները հաշվարկվում են։ Ռադիոիմունային հետազոտության մեխանիզմը մի քանի տարբերակ ունի. Վերևում նկարագրված տեխնիկան հեղուկ փուլային RIA է, քանի որ բոլոր բաղադրիչները գտնվում են հեղուկ վիճակում: Կա RIA և պինդ փուլ, որտեղ հակամարմինները տեղադրվում են հեղուկի մեջ չլուծվող կրիչի մեջ:
Ախտորոշման առկայություն
Այս ախտորոշիչ մեթոդի կիրառումը բժշկության մեջ տարեցտարի ավելի ու ավելի տարածված է դառնում։ Վերջերս ռադիոիմունային անալիզը դարձել է ստանդարտ ախտորոշիչ մեթոդ, որը կարող է նշանակվել բժշկի կողմից վերջնական ախտորոշում կատարելիս: Երկար ժամանակ այս տեսակի անալիզները կատարվում էին միայն լաբորատորիաներում, այսօր այն դարձել է հետազոտության տարածված մեթոդ։ Սակայն RIA-ն պահանջում է թանկարժեք սարքավորումների (գամմա հաշվիչների) օգտագործում, իսկ ռեագենտների հավաքածուներն ունեն կարճ ծառայության ժամկետ: Այս ամենը նման վերլուծության հիմնական թերությունն է, որը որոշում է դրաթանկ արժեք։
Բացի այդ, RIA-ն վերջերս սկսել է փոխարինել ավելի ժամանակակից հետազոտական մեթոդներին, որոնք չեն պահանջում փոխազդեցություն իզոտոպների հետ: Դրանք ներառում են ֆերմենտային իմունային վերլուծություն: Այսպիսով, RIA-ն ցանկալի է շատ կլինիկաներում: Այն վաղուց օգտագործվել է խոշոր քաղաքներում և ախտորոշիչ կենտրոններում, սակայն փոքր քաղաքների սովորական հիվանդանոցներում այս անալիզը գործնականում չի կիրառվում՝ բարձր արժեքի պատճառով:
RIA-ի արժանապատվություն
Ռադիոիմունոուսումն ունի բազմաթիվ առավելություններ: Այն բավականին սպեցիֆիկ է և ունի բարձր զգայունություն, ինչը հնարավորություն է տալիս որոշել կենսաբանական ակտիվ նյութերի առկայությունը աներևակայելի փոքր քանակությամբ։ Այս անալիզը կատարվում է շատ պարզ, մարդուց միայն պահանջվում է երակային արյուն հանձնել։ Թեստի արդյունքները 100% ճշգրիտ են և պատրաստ են հենց հաջորդ օրը: RIA-ն կարող է նաև հեշտությամբ ավտոմատացվել: Այսպիսով, այս վերլուծությունը թույլ է տալիս բացահայտել վարակիչ բակտերիաների թափոններ հանդիսացող սպիտակուցները, ինչը վկայում է օրգանիզմում վարակի առկայության մասին։
Ախտորոշում վիրուսաբանության մեջ
Առավել հեռանկարային RIA-ն վիրուսաբանության համար է, քանի որ այն թույլ է տալիս արագ բացահայտել վիրուսային պաթոգենները: Դա պայմանավորված է նրանով, որ վերջին տարիներին աճում է տարբեր վարակների դեպքերը, որոնք մեծ արագությամբ տարածվում են՝ առաջացնելով մարդկանց մահացություն։ Սա հատկապես վերաբերում է այն երկրներին, որոնք չունեն բարձրսոցիալական և տնտեսական զարգացումը (Հեռավոր Արևելքի երկրներ), ռադիոիմունային հետազոտությունն այստեղ ուղղակի անփոխարինելի է։ Մանրէաբանությունը նաև օգտագործում է այս ախտորոշիչ մեթոդը ախտածին բակտերիաների հետևանքով առաջացած վարակիչ հիվանդությունները հայտնաբերելու համար: Օրինակ, RIA-ն լայնորեն կիրառվում է որովայնային տիֆի հայտնաբերման համար: Հիվանդության առաջին օրերին, նախքան բուժման նշանակումը, անհրաժեշտ է անցկացնել կղանքի և փսխման հետազոտություն: Սակայն ախտորոշման արդյունքները ձեռք կբերվեն երկար ժամանակ անց։ Այստեղ օգնության է գալիս RIA-ն, վերլուծությունը թույլ է տալիս կարճ ժամանակում բացահայտել հիվանդության հարուցիչը։ Մարդը արյուն է հանձնում, հաջորդ օրը հետազոտության արդյունքները պատրաստ են։ Այս վերլուծությունը օգնում է ճշգրիտ ախտորոշում կատարել։
Արդյունքներ
Ռադիոիմունային անալիզը ներկայումս ամենազգայուն ախտորոշման մեթոդներից է: Այն օգտագործվում է ցանկացած նյութի վերլուծության համար, որի դեմ կարելի է հակամարմիններ ստանալ: Այս մեթոդը հնարավորություն է տալիս բազմաթիվ նմուշներ պատրաստել հետազոտված հեղուկի ամենափոքր ծավալով, ինչպես նաև գրանցել արդյունքները ամենակարճ ժամկետում, քանի որ այն կարող է լիովին ավտոմատացվել: Այս վերլուծությունը մշակվել է 1950-ականներին Սոլոմոն Բուրսոնի կողմից։ Երեսուն տարի անց այն լայն տարածում գտավ։ Մինչ օրս RIA-ին հարյուր տոկոսով այլընտրանք չկա, քանի որ վերլուծությունն ունի բարձր զգայունություն: RIA-ն օգտագործվում է բժշկության տարբեր ճյուղերում, ինչպես նաև մանրէաբանության և վիրուսաբանության մեջ։
Վերջապես
Մեթոդի կիրառումը վիրուսաբանության մեջ այսօր շատ արդիական է, ինչպես տալիս էվարակների տարածումը հետաքննելու, ճշգրիտ ախտորոշում կատարելու և կոնկրետ բուժում նշանակելու կարողություն։ Այս խնդիրը հատկապես արդիական է տնտեսության և սոցիալական զարգացման ցածր մակարդակ ունեցող երկրների համար։ Նաև այս վերլուծությունը թույլ է տալիս բացահայտել մարդու մարմնում հորմոնների և ֆերմենտների քանակը: Հուսալի արդյունքներ ստանալու համար հետազոտողին անհրաժեշտ է միայն արյուն հանձնել անալիզների համար: Բժշկությունը կանգ չի առնում, ռադիոիմունային հետազոտության հետ մեկտեղ հայտնվում են հետազոտության նոր մեթոդներ, սակայն ՌԻԱ-ն շարունակում է մնալ բժշկական ախտորոշման առաջատարներից մեկը։
