Բակտերիաների աճեցում. մեթոդներ, սկզբունքներ, քայլեր և պայմաններ

2024 Հեղինակ: Angel Austin | [email protected]. Վերջին փոփոխված: 2023-12-17 05:30

Մեզ շրջապատող բնության միկրոօրգանիզմները ամենուր են՝ հողերում, ջրային մարմիններում, տարբեր առարկաների մակերեսին, նրանցով բնակեցված են մարդիկ և կենդանիները: Այս ամենը կարող է ծառայել որպես սննդամթերքի, դեղերի և արտադրական գծերի մանրէաբանական աղտոտման աղբյուր։ Բակտերիաների աճեցումը անհրաժեշտ է նրանց հատկությունները, կարիքները և բնութագրերը ուսումնասիրելու համար: Սա, իր հերթին, կարևոր քայլ է տարբեր դեղամիջոցների մշակման, հիվանդությունների լաբորատոր ախտորոշման, արտադրական ռեակտորների հաշվարկի և շատ ավելին։

Ընդհանուր հասկացություններ

Մանրէաբանության մեջ մանրէների մշակումը վերաբերում է լաբորատոր պայմաններում իրականացվող միկրոօրգանիզմների մշակմանը։ Իր հերթին, մանրէները, որոնք աճել են ընտրված սննդային միջավայրի վրա, կոչվում են մշակույթ: Մշակույթները կարող են խառնվել, եթե դրանք ձևավորվել են տարբեր տեսակի միկրոօրգանիզմների կողմից, և մաքուր, եթե դրանք ներկայացված են միայն մեկ տեսակի բակտերիայով:

Եթե սննդարար էՄիջավայրում տեղադրվում է միայն մեկ բջիջ, և դրա բազմացման արդյունքում ստացվում է անհատների խումբ, ապա միկրոօրգանիզմների այս խումբը կոչվում է կլոն։ Երբ կլոնը զարգանում է այնքան, որ տեսանելի է դառնում անզեն աչքով, բակտերիաների այս հավաքածուն կոչվում է գաղութ։

Սովորաբար տարբեր աղբյուրներից մեկուսացված բակտերիաների մշակումն իրականացվում է միմյանցից առանձին։ Յուրաքանչյուր այդպիսի առանձին աճեցված մանրէների խումբ կոչվում է շտամ: Այսպիսով, եթե ստաֆիլոկոկի մի տեսակ մեկուսացված է երեք աղբյուրից (կամ նույն արտադրանքի տարբեր մասերից, տարբեր մարդկանցից), ապա նրանք խոսում են այս տեսակի ստաֆիլոկոկի երեք շտամների մասին:

Բակտերիաների աճի գործոններ

Դրանք ներառում են տարբեր ամինաթթուներ, լիպիդներ, պուրինային հիմքեր և միկրոօրգանիզմների զարգացման համար անհրաժեշտ այլ միացություններ: Որոշ մանրէներ կարող են ինքնուրույն արտադրել իրենց անհրաժեշտ նյութերը, իսկ մյուսները պետք է ստանան դրանք պատրաստի տեսքով: Որոշակի աճի գործոններում միկրոօրգանիզմների կարիքների համաձայն՝ իրականացվում է բակտերիաների նույնականացում և տարբերակում։ Նաև այս պարամետրը կարևոր է լաբորատոր և կենսատեխնոլոգիական աշխատանքների համար սննդանյութի ճիշտ պատրաստման համար.

• Ամինաթթուներ. Բակտերիաները կարող են պահանջել մեկ կոնկրետ ամինաթթու կամ թթուների խումբ: Այսպիսով, կլոստրիդիային անհրաժեշտ է լեյցին և թիրոզին, streptococci-ին՝ լեյցին և արգինին: Միկրոօրգանիզմները, որոնց աճի համար պահանջվում են դրսից ամինաթթուներ, կոչվում են ավքսոտրոֆներ:
• Պուրինային և պիրիմիդինային հիմքերը, ինչպես նաև դրանց ածանցյալները (ադենին, գուանին և այլն): Նրանք շատերի աճի կարևոր գործոն ենStreptococcus տեսակ.
• Վիտամիններ. Դրանք բակտերիաների կողմից պահանջվող կոենզիմների մի մասն են: Այսպիսով, նիկոտինաթթուն, ինչպես նաև դրա ամիդը, որոնք NAD-ի և NADP-ի մաս են կազմում, անհրաժեշտ են դիֆթերիայի և շիգելլա կորինեբակտերիաների համար: Թիամինը, որպես պիրոֆոսֆատի անբաժանելի մաս, պահանջվում է ոսկեգույն ստաֆիլոկոկի, պնևմոկոկի, բրուցելայի կողմից: Պանտոտենաթթուն, որը հանդիսանում է CoA կոֆերմենտի մի մասը, պահանջվում է տետանուսի բացիլների և streptococcus-ի որոշ տեսակների համար: Ցիտոքրոմները, հետևաբար նաև ֆոլաթթուն, հեմերը և բիոտինը, որոնք կազմում են դրանք, անհրաժեշտ են Mycobacterium tuberculosis-ի և Haemophilus influenzae-ի համար:

Շրջակա միջավայրի պահանջներ

Պայմաններ բակտերիաների մշակման համար կուլտուրայի միջավայրերի համար.

1. Սնուցում. Դրանք պետք է պարունակեն նյութեր, ընդ որում՝ հեշտ մարսվող ձևով, որոնք անհրաժեշտ են միկրոօրգանիզմների կերակրման և էներգիան համալրելու համար։ Դրանք ներառում են օրգանոգեններ և հանքանյութեր: Որոշ միկրոօրգանիզմներ լրացուցիչ պահանջում են վիտամիններ և ամինաթթուներ, որոնք նրանք չեն կարող սինթեզել:
2. Օպտիմալ pH մակարդակ. Այն ազդում է բջջաթաղանթի թափանցելիության և, համապատասխանաբար, մանրէի կողմից սննդանյութերը կլանելու ունակության վրա։ Ամենից հաճախ pH-ի արժեքը պետք է լինի 7, 2–7, 4 մակարդակի վրա: Շատ միկրոօրգանիզմներ իրենց կյանքի ընթացքում արտադրում են թթվային կամ ալկալային ռեակցիաներով արտադրանք, և որպեսզի սննդային միջավայրի pH-ը չփոխվի, այն պետք է բուֆերացված լինի:
3. Իզոտոնիկ. Բակտերիաների աճեցման համար սնուցող միջավայրում օսմոտիկ ճնշումը պետք է ունենա նույն արժեքները, ինչմանրէաբանական բջիջների ներսում: Այն սովորաբար համապատասխանում է 0,5% NaCl լուծույթին:
4. Աստերիլություն. Դա պայմանավորված է նրանով, որ օտար բակտերիաների տեսքը կխեղաթյուրի վերլուծված շտամի ուսումնասիրության արդյունքները։
5. Խոնավության մակարդակ. Այս ցուցանիշը, միջավայրի հետևողականության հետ մեկտեղ, պետք է ունենա օպտիմալ բնութագրեր որոշակի տեսակի բակտերիաների համար:
6. Օքսիդացման պոտենցիալ (RH2): Այն ցույց է տալիս էլեկտրոններ նվիրաբերող և ընդունող նյութերի հարաբերակցությունը, ինչպես նաև սնուցող միջավայրի թթվածնով հագեցվածության մակարդակը։ Աերոբների և անաէրոբների համար բակտերիաների մշակման պայմանները որոշակիորեն տարբերվում են այս ցուցանիշով: Անաէրոբ միկրոօրգանիզմները լավագույնս վերարտադրվում են RH2 5-ից ցածր արժեքներով, իսկ աերոբ միկրոօրգանիզմները՝ առնվազն 10:
7. Միասնություն. Կարևոր է, որ մշակության միջավայրը պարունակի իր առանձին բաղադրիչների մշտական քանակություն: Բացի այդ, նախընտրելի են թափանցիկ լուծույթներ, որոնք հեշտացնում են մշակաբույսերի աճի մոնիտորինգը կամ աղտոտվածությունը նկատելը:

Կուլտուրայի միջավայրի տեսակները

Միկրոօրգանիզմների աճեցման համար որոշակի միջավայրի ընտրության վրա ազդում են բազմաթիվ գործոններ, որոնց թվում են դրանց սնուցման առանձնահատկությունները և հետազոտության նպատակը: Սննդանյութերի դասակարգման հիմքում ընկած հիմնական հատկանիշներն են՝

1. Բաղադրիչներ. Ըստ սկզբնական նյութերի, որոնք օգտագործվում են ենթաշերտի ստեղծման համար՝ առանձնացնում են՝

• բնական, որոնք պատրաստված են կենդանական կամ բուսական ծագման մթերքներից (օրինակ՝ միս, կաթ, մրգեր) և հարմար են խառը աճեցնելու համար։մշակաբույսեր;
• կիսասինթետիկ, որտեղ թանկարժեք բնական սննդամթերքը փոխարինվում է ոչ պարենային ապրանքներով (օրինակ՝ ոսկրային ալյուր, արյան մակարդուկներ) և որոնք օպտիմալ են բակտերիաների որոշակի տեսակների մշակման կամ դրանց նյութափոխանակության արտադրանքները մեկուսացնելու համար։ միջավայր;
• սինթետիկ, որոնք պատրաստված են ճշգրիտ քանակությամբ քիմիական միացություններից, ունեն հայտնի հաստատուն բաղադրություն և հեշտությամբ վերարտադրելի են:

2. Հետևողականություն (խտություն): Տարբերակել միջավայրերը՝

• հեղուկ;
• խիտ;
• կիսահեղուկ.

Վերջին երկուսը պատրաստվում են հատուկ լուծույթներից կամ հեղուկ նյութերից՝ ագար-ագարի կամ ժելատինի ավելացմամբ՝ անհրաժեշտ խտությունը ստեղծելու համար։ Բացի այդ, բակտերիաների աճի համար խիտ միջավայր է մակարդված արյան շիճուկը, կարտոֆիլը, սիլիկա գելը, կարագինանը:

3. Բաղադրյալ. Այս հիման վրա միջավայրերն են՝

• պարզ, որոնց ցանկը կարճ է՝ Մսի պեպտոն արգանակ (MBB), Hottinger արգանակ և ագար, Մսային պեպտոն ագար (MPA), սննդարար ժելատին և պեպտոն ջուր։
• կոմպլեքս՝ պատրաստված պարզից՝ արյան, շիճուկի, ածխաջրերի և այլ նյութերի ավելացումով։

4. Նշանակում. Առանձնացվում են հետևյալ սննդանյութերը՝

• հիմնականն օգտագործվում է բազմաթիվ պաթոգեն միկրոբների աճեցման համար (սովորաբար պարզ կազմով);
• հատուկները օգտագործվում են բակտերիաների մեկուսացման և մշակման համար, որոնք չեն աճում պարզ սուբստրատների վրա;
• սելեկտիվը (դրանք նաև ընտրովի են) հարմար են որոշակի տեսակի բակտերիաների մեկուսացման համար և արգելակում են հարակից մանրէների աճը (ընտրողականությունստեղծվել է միջավայրում որոշակի նյութեր ավելացնելով, ինչպիսիք են հակաբիոտիկները կամ աղերը, կամ կարգավորելով pH-ը);
• դիֆերենցիալ ախտորոշումը հնարավորություն է տալիս տարբերել բակտերիաների մի տեսակը մյուսից՝ գնահատելով ֆերմենտային ակտիվությունը, օրինակ՝ միջավայրի;

Նմուշների հետագա տեղափոխմամբ նախնական պատվաստման համար անհրաժեշտ են կոնսերվանտներ, քանի որ դրանք կանխում են միկրոօրգանիզմների մահը, ինչպես նաև արգելակում են այլ բակտերիաների աճը։

Մեդիապատրաստում

Անաէրոբ բակտերիաների աճեցման ամենակարևոր քայլը համապատասխան սննդային միջավայրի պատրաստումն է: Օպտիմալ պարամետրերն ընտրելուց հետո անցեք հետևյալ փուլերին՝

• քաշում՝ ընտրելով բաղադրիչների նմուշ անալիտիկ հաշվեկշռում;
• լուծարումը կատարվում է թորած ջրի մեջ, որը տաքացվում է մինչև 70 ° C, և ֆոսֆատները, միկրո և մակրոաղերը լուծվում են առանձին;
• եռացնել ջրային բաղնիքում երկու րոպե;
• pH-ի որոշում ցուցիչ թղթի կամ պոտենցիոմետրի միջոցով;
• զտում թաց կտորի կամ թղթե ֆիլտրերի միջոցով հեղուկի, ինչպես նաև հալած խիտ միջավայրի համար, և բամբակյա շղարշ ֆիլտրի միջոցով ագարի միջավայրի համար;
• շշալցումը կատարվում է 3/4 հզորությամբ;
• միջին կախված ստերիլիզացում;
• Աստերիլության հսկողությունն իրականացվում է թերմոստատում երկու օր նստեցնելով, այնուհետև դիտելով;
• քիմիական հսկողություն՝ pH-ը և անհրաժեշտ պարունակությունը հաստատելու համարտարրեր;
• կենսաբանական հսկողություն փորձնական պատվաստմամբ։

Ապակյա իրերի և կրիչների ստերիլիզացում

Բակտերիաների աճեցման հիմնական սկզբունքներից մեկը ստերիլությունն է: Օտար միկրոօրգանիզմների աճն ու զարգացումը կարող է ազդել սննդարար միջավայրի բնութագրերի վրա՝ փոխելով նրա քիմիական կազմը և pH-ը: Մաքուր մշակույթների աճեցման հիմնական պայմանը ստերիլիզացումն է։ Գործնականում այս տերմինը նշանակում է ստերիլիզացված առարկաների մակերեսի վրա և ծավալով կյանքի բոլոր ձևերի ոչնչացման մեթոդները: Անոթները, օգտագործված գործիքները, կրիչները և հետազոտության ընթացքում օգտագործված այլ իրերը ստերիլիզացված են։

Մատերիզացման որոշ տեսակներ.

• Բոցավառում. Սերմնացանի օղակների և ասեղների, ապակե սլայդների, որոշ գործիքների մանրէազերծումը կարող է իրականացվել այրիչի կամ հոգու լամպի միջոցով:
• եռում. Հարմար է ներարկիչների, ասեղների, սննդի հետ աշխատելու համար, բայց չի սպանում բակտերիաների սպորները:
• Չոր ջերմային ստերիլիզացում. Այն իրականացվում է հատուկ չորացման պահարանում և հարմար է կոլբայի, փորձանոթների և այլ լաբորատոր ապակյա իրերի մշակման համար։
• Գոլորշիով ստերիլիզացում. Այս մեթոդը, որն իրականացվում է ավտոկլավում, շատ արդյունավետ է: Բայց այն հարմար չէ սպիտակուցներ կամ որևէ այլ միացություն պարունակող սննդանյութերի համար, որոնք քայքայվում են բարձր ջերմաստիճանում: Ավելի խնայողություն կարելի է անվանել տինդալիզացիա։ Այն իրականացվում է Կոխի կաթսայում և համատեղում է սպորների բողբոջումը դրանց ոչնչացման հետ։
• Պաստերիացում. Այն օգտագործվում է այն կրիչների համար, որոնք եփելիս փոխում են իրենց հատկությունները (օրինակ՝ կաթ, գինի, գարեջուր), որոնք կարող ենազատել դրանք սպոր չպարունակող միկրոօրգանիզմներից: Մշակման ջերմաստիճանը ընդամենը 50-60 ° C է տասնհինգից երեսուն րոպեի ընթացքում: Որոշ դեպքերում օգտագործվում է սառը ստերիլիզացում՝ ֆիլտրերի կամ ուլտրամանուշակագույն ճառագայթների միջոցով։

Բակտերիաների աճեցման պայմաններ

Բակտերիաների աճն ու զարգացումը հնարավոր է միայն որոշակի գործոնների և դրանցից յուրաքանչյուրի արժեքների ներքո.

1. Ջերմաստիճանը. Գոյություն ունեն բակտերիաների երեք խումբ, որոնք տարբերվում են ջերմաստիճանի նախապատվություններով.

• թերմոֆիլները կամ ջերմասեր միկրոբները աճում են 45-90°C ջերմաստիճանում, ինչը նշանակում է, որ նրանք չեն բազմանում մարդու և կենդանիների օրգանիզմներում.
• հոգեֆիլները կամ ցուրտ սիրող միկրոօրգանիզմները նախընտրում են ջերմաստիճանը 5-15 ° C-ի սահմաններում և աճեցվում են սառնարաններում;
• մեզոֆիլներ, զարգանում են 25-37 ° C ջերմաստիճանում, դրանք ներառում են բակտերիաների մեծ մասը:

2. Լույս. Դա ֆոտոտրոֆ բակտերիաների աճեցման առանձնահատկությունն է, քանի որ նրանք իրականացնում են ֆոտոսինթետիկ գործընթաց։ Բայց մանրէների մեծամասնության համար լուսավորությունը նախապայման չէ: Եվ նույնիսկ հակառակը, արևի ուլտրամանուշակագույն ճառագայթումը կարող է ճնշել դրանց զարգացումը։

3. Ջուր. Բոլոր միկրոօրգանիզմներին անհրաժեշտ է ջուր մատչելի (հեղուկ) տեսքով: Ահա թե ինչու սառեցված սննդամթերքը մանրէներ չի աճում, կամ ընդհանրապես չի աճում։

4. Շրջակա միջավայրի թթվայնությունը. Բակտերիաների մշակման այս սկզբունքն արդեն մանրամասն քննարկվել է վերևում։

5. Օդափոխություն. Թթվածինը, որպես քիմիական տարր, ջրի անբաժանելի մասն է և զգալի քանակությամբ միացություններ, որոնք օգտագործվում ենմիկրոօրգանիզմների մշակում. Գազային թթվածինը կարող է պարունակվել նաև ջրի և այլ հեղուկների մեջ՝ լուծված վիճակում։ Բակտերիաների զգալի մասը թթվածնի մոլեկուլների մշտական մատակարարման կարիք ունի։ Բայց մի շարք միկրոօրգանիզմների համար դա ավելորդ է, կամ, ավելի վատ, գազային թթվածինը թունավոր է նրանց համար, քանի որ նրանք չունեն կատալազ և պերօքսիդազ, որոնք ոչնչացնում են թունավոր շնչառական արտադրանքները: Հետևաբար, անաէրոբ բակտերիաների աճեցման ամենակարևոր քայլը O₂ մոլեկուլների հեռացումն է սննդարար միջավայրից:

6. Միկրոօրգանիզմների աճեցում. Աերոբ և անաէրոբ բակտերիաների մշակումն իրականացվում է շրջակա միջավայրի տարբեր շերտերում և տարբեր եղանակներով։

Աերոբ միկրոօրգանիզմների աճեցում

Աերոբ բակտերիաների աճեցման համար անհրաժեշտ է մոլեկուլային թթվածին: Աերոբների մաքուր կուլտուրաներ ստանալու համար, որոնք կարող են հաջողությամբ օգտագործվել բժշկության և սննդի արդյունաբերության մեջ, օգտագործվում են հետևյալ մեթոդները՝

• մակերեսը աճում է խիտ միջավայրում կամ հեղուկ միջավայրում (դրանց բարակ շերտը), երբ թթվածինը գալիս է անմիջապես օդից;
• խորը մշակում հեղուկ միջավայրում, երբ դրանցում լուծված թթվածնի քանակի աճ է ձեռք բերվում մշտական օդափոխության միջոցով։

Անաէրոբ միկրոօրգանիզմների մշակում

Այս տեսակի բակտերիաների մշակման հիմնական սկզբունքը նրանց նվազագույն շփումն է մթնոլորտային թթվածնի հետ: Նրանց աճի համար պայմաններ ապահովելը շատ ավելի դժվար է, քան աերոբների համար։ Հետևյալ մեթոդները օգտագործվում են մոլեկուլային O₂:

-ից անաէրոբները մեկուսացնելու համար

1. Ֆիզիկական. Անաէրոբ բակտերիաների աճեցման այս մեթոդը կրճատվում է մինչև դրանց մշակումը հատուկ վակուումային ապարատում՝ միկրոանաէրոստատում: Նրանում օդը փոխարինվում է ազոտի հատուկ գազային խառնուրդով՝ 10% ջրածնի և 5% ածխածնի երկօքսիդի ավելացմամբ։
2. Քիմիական. Դրանք ներառում են. կամ նվազեցնող նյութեր (օրինակ՝ ասկորբինաթթու):
3. Կենսաբանական. Դա հանգում է փակ համակարգում աերոբների և անաէրոբների համատեղ մշակմանը։ Բակտերիաների մշակման այս մեթոդը ներառում է Պետրիի ճաշատեսակի մի կեսը բակտերիաների մի քանի աերոբ տեսակների ցանքս, իսկ մյուս կեսը՝ ուսումնասիրված անաէրոբով: Նրա զարգացումը կսկսվի այն պահին, երբ ամբողջ թթվածինը սպառվի։

Սերմնավորման հետևյալ մեթոդները հարմար են անաէրոբ բակտերիաների մշակման համար.

• մակերեսային շերտում;
• ստերիլ պարաֆինով լցված մակերեսային շերտում;
• խիտ սննդարար միջավայրում;
• մածուցիկ միջավայրի խորը շերտերում:

Ստանալով մաքուր մշակույթ

Միկրոբիոլոգները սովորաբար աշխատում են տարբեր տեսակի մանրէներով բնակեցված նմուշների հետ: Այնուամենայնիվ, միկրոօրգանիզմների (ընտանիք, սեռ, տեսակ) համակարգված դիրքը որոշելու, ինչպես նաև դրանց բնութագրերը ուսումնասիրելու համար անհրաժեշտ է դրանք մեկուսացնել և մաքուր մշակույթ աճեցնել: Դրանք մեծ նշանակություն ունեն սննդի արդյունաբերության բազմաթիվ ոլորտներում, օրինակ՝ պանիր, հաց, կվաս, գինի և այլն։ Կաթնաթթվային բակտերիաների մշակումը հնարավորություն է տալիս ստանալէական բաղադրիչ ֆերմենտացված կաթնամթերքի, խմորի, կակաոյի, սիլոսի և նույնիսկ պլաստիկի արտադրության համար։

Մաքուր մշակույթը խիտ միջավայրում մեկուսացնելու մեթոդը հիմնված է միկրոօրգանիզմների բջիջների մեխանիկական տարանջատման վրա՝ դրանց հետագա մեկուսացված աճեցմամբ: Նմուշը տեղափոխվում է ջրի կամ աղի ստերիլ ծավալի մեջ (ծավալը 10-100 մլ), այնուհետև երկու րոպե թափահարում են: Ուսումնասիրվող նյութի հաստության մեջ գտնվող միկրոօրգանիզմները (օրինակ՝ երշիկեղեն կամ պանիր) դուրս հանելու համար կատարվում է նմուշի կտորները ավազով ստերիլ գործիքներով քսում։ Նախնական պատրաստման ենթարկված 1 գ կամ 1 մլ ծավալով նյութը նոսրացնում են ստերիլ ջրով 10, 100, 1000 և այլն անգամ։ Ընտրված է նոսրացման աստիճանը, որը տալիս է մեթոդի հնարավորություններին համապատասխան բջիջների կոնցենտրացիան։

Միկրոօրգանիզմների հետագա աճեցումը սննդարար միջավայր պատրաստելն է: Սովորաբար ընտրվում է խիտ միջավայր (MPA): Այն նախ հալեցնում են և սառեցնում մինչև 45-50 °C, և միայն դրանից հետո այն լցնում են մի քանի Պետրի ամանների մեջ (երեքից հինգ կտոր), որոնց հատակին տեղադրվում են տարբեր կոնցենտրացիաների փորձնական նյութից շվաբրեր։ Այնուհետև կատարվում է դեռևս չսառեցված սննդարար միջավայրի և դրա մեջ ներմուծված նյութի խառնումը։ Ահա թե ինչպես են բջիջները ամրացվում ենթաշերտի ծավալի տարբեր կետերում։

Հաջորդը Պետրի ափսեները տեղադրվում են 2 օր 22 °C ջերմաստիճանում թերմոստատի մեջ: Այդ ընթացքում բջիջներն այնքան են բազմանում, որ բջիջներից յուրաքանչյուրի կողմից գոյացած գաղութը տեսանելի է դառնում անզեն աչքով։ Նրանցից յուրաքանչյուրը բակտերիաների տեսակի մաքուր մշակույթ է, որոնց բջիջներից այնվարդ.

Դրանից հետո, Պետրիի կերակրատեսակներից միկրոօրգանիզմները ենթամշակվում են առանձին փորձանոթների մեջ՝ լցված սննդարար միջավայրով: Այս կերպ մաքուր կուլտուրաները մեկուսացվում են խառը նմուշից: Այս մեթոդը կրում է իր մշակողի անունը՝ Ռ. Կոխ։ Այն սովորաբար կոչվում է նաև գավաթային մեթոդ կամ ցանքսափող ցանք: Տարբեր տեսակի բակտերիաների մաքուր կուլտուրաներ ստանալուց հետո որոշվում են դրանց ձևը, սպորները և ընտանիքները։

Բոլոր աշխատանքները պետք է կատարվեն ասեպսիսի սկզբունքներով։ Միկրոօրգանիզմների վաղաժամ զարգացումից խուսափելու համար հետազոտությունը պետք է իրականացվի նմուշառումից անմիջապես հետո: Ծորակի ջուրը վերլուծվում է առաջին մասերը չորացնելուց հետո, քանի որ դրանք կարող են պարունակել խողովակներում և ծորակներում կուտակված մանրէներ: Մրգերի, հատապտուղների և բանջարեղենի միկրոֆլորան հիմնականում գտնվում է մակերեսի վրա (կեղև), հետևաբար դրանից լվացումներ են կատարվում։ Դա անելու համար պտուղը տեղադրեք ստերիլ տարայի մեջ և լցրեք այն անհրաժեշտ քանակությամբ ջրով։ Այնուհետեւ դրանք բավական ուժգին թափահարում են, եւ ջուրը լցնում են մեկ այլ տարայի մեջ։ Կտորից ստացված բերքը նույնպես ստացվում է շվաբրով, սակայն նախապես դրանցից կտրում են որոշակի չափի կտորներ։