Մեթոդներ տեղումների ռեակցիայի ստեղծման համար

Բովանդակություն:

Մեթոդներ տեղումների ռեակցիայի ստեղծման համար
Մեթոդներ տեղումների ռեակցիայի ստեղծման համար
Anonim

Այս հոդվածը նվիրված կլինի տեղումների ռեակցիայի երևույթին։ Այստեղ կդիտարկենք այս երևույթի ձևակերպման առանձնահատկությունները, դիֆուզիայի երևույթը, ընդհանուր բնութագրերը, դերը մարդու կյանքում և շատ ավելին։

ներածություն ֆենոմենի

Տեղումների ռեակցիայի ընդհանուր բնութագիրը
Տեղումների ռեակցիայի ընդհանուր բնութագիրը

Տեղումները շճաբանական տիպի երևույթ է, որի ժամանակ լուծվող անտիգենները փոխազդում են հակամարմինների հետ և արդյունքում նկատվում են տեղումներ՝ նստվածք։

Տեղումների ռեակցիայի ընդհանուր բնութագիրը ձև է հակագենի և հակամարմինների համակարգված ազդեցություն. Այս տեսակի փոխազդեցությունները հնարավորություն են տալիս պարզել անհայտ անտիգենների առկայությունը փորձարկվող նյութում՝ ավելացնելով հայտնի հակամարմիններ և անտիգեններ: Առանց աղերի առկայության տեղումների գործընթացը կշարունակվի ավելի վատ, և լավագույն օպտիմալը գտնվում է 7,0-7,4 pH-ի սահմաններում:

Ռեակցիայի բաղկացուցիչները

տեղումների ռեակցիայի բաղադրիչները
տեղումների ռեակցիայի բաղադրիչները

Տեղումների ռեակցիայի բաղադրիչներից կա երեք հիմնական տարր.

  1. Մոլեկուլային բնույթ ունեցող հակագեն: Այն գտնվում է նուրբ տիպի վիճակում, այլ կերպ ասած՝ այնլուծելի. Նաև այդպիսի անտիգենը կոչվում է պրեցիպիտոգեն, որը լիզատ է կամ հյուսվածքային էքստրակտ և այլն: Պրեցիպիտոգենը բնորոշ տարբերություն ունի ագլյուտինոգենից, որը կախված է այն մասնիկների չափից, որից այն բաղկացած է: Ագլյուտինոգենն ունի բջջի բնորոշ չափս, և նստվածքային նյութերը համաչափ են մոլեկուլի չափերին: Հակագենային լուծույթը բնութագրվում է թափանցիկությամբ:
  2. Հակամարմին, որը հայտնաբերված է մարդու արյան շիճուկում, ինչպես նաև իմունային ախտորոշիչ շիճուկում, որը պարունակում է ուսումնասիրված հակամարմիններ։
  3. Էլեկտրոլիտները նատրիումի քլորիդի լուծույթներ են, որոնք իզոտոնիկ են:

Պրեցիպիտոգեն արտադրություն

Առանց տեղումների ռեակցիայի ստեղծումն անհնար է առանց նստվածքային նյութի, որը ստացվում է նյութերի մանրացման և դրանցից սպիտակուցային անտիգենների արդյունահանման արդյունքում: Էքստրակցիան տեղի է ունենում եռալով կամ այլ եղանակներով:

Լիզատները, ինչպես նաև հյուսվածքների և օրգանների էքստրակտները, արյան շիճուկը, տարբեր տեսակի ֆիլտրատները, որոնք հիմնված են մանրէաբանական արգանակի կուլտուրաների վրա, ինչպես նաև միկրոօրգանիզմների աղի էքստրակտը և ավտոլիզատային նյութերը, ապշեցուցիչ են: precipitogens օրինակ:

Կարգավորում տեղումների ժամանակ

Այժմ դիտարկենք տեղումների ռեակցիայի ստեղծման եղանակը։

Կատարվում է օղակաձև տեղումների ռեակցիա, որը տեղի է ունենում հատուկ պատրաստված փորձանոթներում։ Շիճուկը ներմուծվում է սպասքի խոռոչի մեջ՝ այն լցնելով պատի վրայով պիպետտի ժայթքման միջոցով։ Այնուհետև վերևում զգուշորեն շերտավորվում է համապատասխան քանակությամբ նստեցնող սարք, այնուհետև խողովակը հորիզոնականից բերվում է ուղղահայաց դիրքի:Տեղումների արձագանքը տեղադրելը և հաշվի առնելը շատ մանրակրկիտ գործողություն է: Արդյունքը գրանցվում է անտիգենի և հակամարմինների միջև սահմանին սպիտակ օղակի հայտնվելուց հետո։ Եթե ռեակցիայի փոխազդող տարրերը համապատասխանում են միմյանց, ապա դրանք կապվում են, բայց դա նկատելի է դառնում դրանց փոխազդեցությունից երկար ժամանակ անց։ սլայդ, որտեղ տեղափոխվում է ագար գելը, այն քսելով փոքր շերտով։ Գելի մեջ կարծրանալուց հետո փոքր քանակությամբ հորեր են կտրվում, որոնց մեջ կտեղադրվեն անտիգեններ և հակամարմիններ: Այս գործողությունն իրականացնելու երկու եղանակ կա՝ ճառագայթային իմունոդիֆուզիոն և կրկնակի իմունոդիֆուզիա։

տեղումների արձագանքը չի օգտագործվում
տեղումների արձագանքը չի օգտագործվում

Ընդհանուր տեղեկություններ

Տեղումների աշխատանքի մեխանիզմը նման է ագլյուտինացիայի սարքին։ Իմունային տիպի շիճուկի ազդեցության տակ հակագենը, որն արդեն մտել է ռեակցիայի մեջ, նվազեցնում է իր ցրվածության աստիճանը։ Կարևոր պայմանը և՛ շիճուկի, և՛ հակագենի թափանցիկությունն է:

Դուք կարող եք բարելավել ռեակցիայի գրանցումը, եթե հակամարմինների վրա անտիգեններ տեղադրեք: Արդյունքում նկատվում է նստվածքների տեսք օղակի տեսքով։ Այս երևույթը կոչվում է օղակաձև տեղումներ և իրականացվում է 2,5-ից 3,5 մմ տրամագծով հատուկ խողովակներում։ Տեղումների ռեակցիայի ամենատարածված օրինակներից մեկը սիբիրախտի ախտորոշումն է:

Տեղումները հնարավորություն են տալիս որոշել ագարում դիֆթերիայի մշակույթի թունավորության մակարդակը:

Քննարկվող ռեակցիայի ընթացքումտեղի է ունենում հակագենային համալիրների և հակամարմինների տեղումներ: Տեղումները իմունոլոգիական երևույթ են, որը թույլ է տալիս որոշել հիվանդ կամ պատվաստված մարդու և կենդանիների արյան շիճուկում հակամարմինների քանակը։

Տիտրման հետևանք

տեղումների ռեակցիայի ստեղծման մեթոդներ
տեղումների ռեակցիայի ստեղծման մեթոդներ

Կարևոր է իմանալ, որ վերը նշված մեթոդի տիտրման արդյունքում ստացված տվյալները քանակական չեն: Պարունակվող քանակի հակամարմինների քանակական գնահատական ստեղծելու և վերլուծելու համար Մ. Հայդելբերգերի և Է. Կաբատի կողմից մշակվել է ռեակցիայի հատուկ տեխնիկա, որը հիմնված է համարժեք գոտու որոնման և նույնականացման վրա: Անտիգենների տարիքային թիվը հակաշիճուկի մշտական ծավալի հետ խառնելը հանգեցնում է սկզբնական ձևավորված նստվածքի ավելացմանը, այնուհետև այն կրկին նվազում է հակագենային համալիրները լուծելու ունակության բարձրացման պատճառով: Որոշելով յուրաքանչյուր խողովակի մեջ պարունակվող սուպերնանտների հակամարմինների քանակը՝ կարող եք պարզել, որ հակամարմիններով կերակրատեսակների որոշակի քանակի հեղուկ կբացակայի: Այստեղ, համեմատած մյուս փորձանոթների հետ, կառաջանա ամենամեծ նստվածքը։ Սրա և սպիտակուցների ընդհանուր արժեքից հակագենային սպիտակուցի նստվածքի հանման շնորհիվ հնարավոր է ստանալ հետազոտվող հատուկ շիճուկի ծավալում պարունակվող հակամարմինների ճշգրիտ արժեքը: Ավելին, նստվածքի սպիտակուցի մոլեկուլների քանակը որոշվում է ազոտի քանակով կամ գունաչափական մեթոդների կիրառմամբ։

Արժեքների գնահատում

տեղումների ռեակցիայի կարգավորում և հաշվառում
տեղումների ռեակցիայի կարգավորում և հաշվառում

Ախտորոշման մեթոդաբանության մեջ տեղումների արժեքների գնահատումը պետք է հաշվի առնի իմունային շիճուկում հակամարմինի առկայության հնարավորությունը, որը չունի պրեցիպիտինի հատկություն, որից հետևում է, որ նստվածքն ինքնին չի կարող լինել. ձևավորվել է անտիգենների հետ արձագանքելուց հետո: Նման մոլեկուլների ցանկը ներառում է թերի հակամարմիններ և որոշ տեսակներ գամմա-A գլոբուլինների խմբից։

Տեղումների ռեակցիան լաբորատոր պայմաններում իր կիրառումը գտնում է տարբեր տեսակի մոդիֆիկացիաներում: Օրինակ, ջերմային նստվածքային ռեակցիան օգտագործվում է բոտուլիզմի, սիբիրախտի և այլնի բակտերիալ անտիգենները հայտնաբերելու համար, որոնք չեն ենթարկվում ջերմային դենատուրացիայի։ Ի տարբերություն օղակաձև տեղումների, այս տեսակի ռեակցիան օգտագործում է տվյալ նյութի ֆիլտրատները եռացրած վիճակում:

Կոմպլեքս խառնուրդում տեղումների ռեակցիայի վերլուծությունը թույլ չի տալիս բնութագրել խառնուրդի առանձին տարրերի հատկությունները: Նման դեպքերում մարդը դիմում է ագարում տեղումների եղանակին, ինչպես նաև օգտագործում է իմունոէլեկտրոֆերեզ։

ցրված տեղումներ

տեղումների ռեակցիաներ
տեղումների ռեակցիաներ

Հետազոտության այս ոլորտում կա ցրված տեղումների ռեակցիայի (RPD) հասկացությունը: Այն հիմնված է հակամարմինների և լուծվող անտիգենների գելի մեջ ցրվելու ունակության վրա։ Դիֆուզիան որոշակի նյութի մոլեկուլի` մյուսի մոլեկուլների մեջ ներթափանցելու ունակությունն է, որն առաջանում է ջերմային շարժման արդյունքում: Ամենից հաճախ նման ռեակցիայի համար օգտագործվում է ագար գել։

Պարամետրերը տալուց հետո՝ մ.պայմաններ, որոնց դեպքում մոլեկուլները կարող են ցրվել միմյանց նկատմամբ, նրանց հանդիպումը կուղեկցվի անտիգեն + հակամարմին համալիրի ձևավորմամբ: Նման նորագոյացությունն ի վիճակի է ցրվել՝ գտնվելով հենց գելի մեջ, և այն կթափվի՝ ստանալով շերտի ձև, որը կարելի է հայտնաբերել անզեն աչքով։ Եթե հակագենը և հակամարմինը հոմոլոգ են, ապա ոչ մի շերտ չի ձևավորվի: որոշեք առաջադրանքի տեսակը, որը պահանջվում է: RPD-ն մարդուն հնարավորություն է տալիս հայտնաբերել և բացահայտել անհայտ մեկուսացված վիրուսները՝ թեստավորելով հայտնի հակամարմինների շիճուկների միջոցով:

Դիմում

ցրված տեղումների ռեակցիա
ցրված տեղումների ռեակցիա

Տեղումները լայնորեն կիրառվում են ոչ միայն հիվանդությունների ախտորոշման մեջ, այլև գտնում են իրենց կիրառությունը դատաբժշկական փորձաքննության մեջ։ Դժվար է պատկերացնել անալիզ, որում հնարավոր լինի որոշել արյան տեսակը, օրգանի կամ հյուսվածքի մի մասը, որը հայտնաբերվել է հանցագործության զենքի վրա, որը չի օգտագործում տեղումների ռեակցիա: Այս գործընթացի ընթացքում օգտագործվում են նստվածքային շիճուկներ, որոնք ստացվում են տարբեր կենդանիների և թռչունների իմունիզացիայի միջոցով։ Կարևոր է, որ շիճուկի տիտրի մակարդակը 1:10000-ից ոչ պակաս լինի, և այն նաև ունենա բավարար սպեցիֆիկացիա։ Արյան հայտնաբերված կետից կամ դրա կեղևից քաղվածք են պատրաստում ֆիզիկական համար: լուծում, որը հետագայում կբացահայտվիprecipitating շիճուկ. Այս ռեակցիայի համաձայն՝ հնարավոր է որոշել ինչպես մարդկանց, այնպես էլ կենդանիների հյուսվածքների և օրգանների սպիտակուցների տեսակները։ Ամպամած քաղվածքներ ստանալը ստիպում է դիմել ագարի վրա տեղումների:

Եզրակացություններ

Վերլուծելով կարդացած տեղեկատվությունը, մենք կարող ենք եզրակացնել, որ տեղումների ռեակցիաները չափազանց կարևոր են մարդու համար, քանի որ դրանք թույլ են տալիս ախտորոշել տարբեր անտիգեններ՝ օգտագործելով հակամարմիններ, այս երևույթը լայնորեն կիրառվում է նաև դատաբժշկական փորձաքննության մեջ և թույլ է տալիս բացահայտել հիվանդության տեսակը։ արյուն, հյուսվածք կամ օրգան՝ կապված որոշակի առարկայի հետ։ Գոյություն ունեն տեղումների մի քանի տեսակներ և եղանակներ, որոնք կիրառվում են լուծվող խնդրի առաջացող կարիքներին համապատասխան։

Խորհուրդ ենք տալիս: